2010年1月以来，海南豇豆在全国多个地区连续多次被检测出水胺硫磷、甲胺磷、克百威等禁用农药，由此，农产品中的农药残留问题又一次进入了人们的视线．而农产品农残检测技术也经受了再次考验。瓦里安公司可以为广大食品安全检测实验室提供从样品制备(sPE净化产品和装置)到消耗品(色谱柱等)、仪器分析、方法开发、数据处理及技术支持等一整套的技术解决方案，目前公司已经开发了众多分析方法和常见农药、兽药及抗生素化合物数据库，覆盖600多种农药及蔬菜、水果、饮用水或有机废弃物等多种复杂基质。

    瓦里安公司基于国标GB／T 1 96482005方法和欧盟EN 1 5662方法，开发了用于蔬菜和水果中多农残检测样品前处理方案，包括固相支持液液萃取法(sSLLE法)、QuEChERS方法和Ca rbon／NH2净化法。将该前处理方案与设计独特、功能强大的瓦里安320-MS GC-Ms／MS三重四极杆质谱仪配合使用，可组成强大的高毒农药残留分析解决方案。以下是我们通过试验，得到的蔬菜、水果中多农残检测样品前处理及检测方案。

 

样品前处理方法固相支持液液萃取法(sSLLE法)

    ㈩称样。称取209已匀浆过的蔬菜和水果样品。(2)过滤。加入70mL丙

酮匀浆3mm，抽吸过滤，收集萃取液。过滤后的残渣再用30mL丙酮洗涤并过滤，然后合并萃取液。(3)浓缩净化。35~C旋转蒸发至残留体积达1 8mL左右，过ChemEIut柱(20g，20raL，Va rlan Pa rt№]2198008)净化。(4)上样。将净化后的萃取液载A．CheinE Jut柱，平衡lOmin。(5)洗脱。用4×

20mL乙酸乙酯分次进行洗脱。(6)再次浓缩。旋转蒸发浓缩近干，用5mL丙酮重新溶解，定容。(7)检测。取]mL制好的样作为测试样，直接进样1—2uL，用GC-PFPD或GC-MS／MS进行检测。

 

QuEChERS方法

    (1)称样。称取5g粉碎蔬菜或水果样品，放入50mL特氟龙离心管中。(2)提取。向离心管中加入1 0mL水、1 5mL乙腈和100μL内标(20μg／mL灭蚁灵丙酮溶液)，充分振摇1 mln；再加入4gMgS04、1gNaCI、1g无水柠檬酸三钠和0 5g柠檬酸氢二钠，充分振摇1 mln。(3)离心。在6000r/min离心5min。(4)混合。另取离心管加入25mg Bondesl J PSA吸附剂(BondeSlI PSAlog，Va rlan Part N。1 221 3023)．230mg无水MgS04和2mL萃取液。【5)再次离心。充分振摇30s，6000r/min离心1min。(6)检测。取1mL作为测试样，取上清液浓缩或直接转入样品瓶，直接进样1-2μL，用GC- PFPD或GC-MS／MS检测。

 

Carbon／NH2净化法(GB／T 19648-2005)

    (1)称样。称取10g水果、蔬菜样品，加入50mL乙腈。(2)抽滤、定容。匀浆、抽滤，用20mL乙腈淋洗滤纸上的残留物，合并滤液，最后用乙腈定容至100mL。(3)静置。量取20mL滤液．加入1 0g NaCI和20mL 0 5moI／L的磷酸缓冲液(pH7 0)，充分振摇10min．静置使溶液分层，弃去水相层。(4)脱水。将乙腈层溶液过装有无水硫酸钠的漏斗．并用适量乙腈淋洗漏斗，收集全部滤液。(5)浓缩。在低于40~C温度条件下，浓缩近干，用2mL的乙腈／甲苯(3 1)重新溶解，待净化。(6)SPE净化过程。①活化：用lOmL乙腈／甲苯(3：1)将固相萃取小柱进行活化；②上样将2mL样品待测液载入Ca rbon／NH2(300mg／500mg6mL，Varian Part No 2264265032)：③洗脱用20mL乙腈／甲苯(3：1)进行洗脱；④浓缩：40~C浓缩近干定容至ImL。(7)检测直接进样1-2 μ L，用GC- PFPD或GC MS／MS进行检测。

以上三种方法均可以用于毒豇豆中甲胺磷和水胺硫磷的检测。但SSLLE方法和QuEChERS方法的净化效果略逊于国标GB／T 1 9648-2006 Carbon／NH2净化法，前两种方法与一般的气相色谱检测器联用．可能会出现一些基质干扰，建议选用气相色谱与选择性更强的脉冲式火焰光度检测器PFPD或三重四极杆质谱仪GC-MS／MS配合使用，从而保证最佳检测效果，有效消除假阳性和假阴1生结果。

 

常规高灵敏度GC—MS／MS分析方法

    以下是结合GB／T 1 9648-2005 Cartx~／NH2净"fJ4sk~口瓦里安320 GC-MS／MS92~4谱的二级质谱多反应监测(MRM)技术的一般分析方法，可用于食品安全实验室进行高灵敏度的农残检测。色谱条件

色谱柱：VF 5 m s，0 2 5 μ m，30m×0 2 5mm(Va r旧n P a rt N0 cP8 944)，进样口条件：260~C不分流进样；进样体积1 0μL；柱流速1 OmL／min；柱温条件80℃保持2mln，30~C／ml n升至150℃，2 5℃／mln升至200℃，4℃／mIn升至220℃．30~C／min升至290℃，保持8min；离子化方式：El；碰撞气：2 OmTorr氩气：扫描时间：O .1 s；检测器电压：1420V。仪器自动优化扫描参数见表1。

结果与结论

  该分析方法的样品前处理方法采用国标GB／T]9648-2005 Ca rbon／NH 2净化法．可同时检测近百种农药残留样品，图1是受关注度比较高的四种农药甲胺磷、久效磷、克百威及水胺硫磷空白样品、加标样品、基质加标样品的MRM色谱图(加标样品为样品称重时即加入混合标样的样品，加标浓度为50μg／kg．样品浓缩倍数为2倍i添加样品为阴性样品基质溶液加标，加标浓度为100pg／mL)。由图1可以看出，该四种农药残留的回收率在80～1 20％以内，完全满足国标要求；结合GB／T 1 9 648 2005 ca rbon／NH 2净化法．以及瓦里安3 20一MS GC-MS／MS仪通过惰性离子源和二级质谱多反应监测(MRM)技术，可有效去除基质干扰，增加对复杂基质中待测目标物检测的选择性．从而保证了复杂基质中农残定性定量分析的准确性，顶级的检测灵敏度，可使政府、蔬菜集散地更有效的实施对蔬菜和水果等农残监测与管理，指导菜农科学合理用药。

殷晓燕 吴翠玲 美国瓦里安科技中国有限公司

食品安全导刊，2010（4）