ELSA试剂盒法值得推广的孔雀石绿、结晶紫类物质检测法
孔雀石绿(Malachite Green，MG)、结晶紫(Crystal Violet，cv)作为杀真菌剂和消毒剂被广泛应用于水产养殖。其被鱼体吸收后，会代谢为危害更大的隐性孔雀石绿(LMG)和隐性结晶紫(LCV)，并沉积于脂肪组织，对人畜具有致畸、致癌和致突变的影响，因而在许多国家已被禁用，如欧盟、美国已宣布禁止其在经济鱼类（观赏鱼除外）养殖过程中使用:我国质检总局、国家标准委则共同发布实施了GB/T19857--2005《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》国家标准：韩国孔雀石绿、结晶紫的限量标准为2μ
目前，检测水产品中孔雀石绿、结晶紫类物质的常见方法有ELISA试剂盒、胶体金试纸和仪器检测三类，本文从灵敏度、特异性、准确度和精密度、检测时间、检测成本、所需设备等方面比较了 ELISA方法与其他两种方法，以期为孔雀石绿、结晶紫类物质检测提供借鉴。试验方法
选取市面上具有代表性的一种可检测孔雀石绿的胶体金检测卡，本公司的孔雀石绿检测试剂盒(1)、一种进口 ELISA试剂盒(II)、一种国产ELISA试剂盒(III)以及仪器方法(HPLC和HPLC MS)进行试验。阴性样本通过高效液相色谱(HPLC)检测后定值。
试验结果
灵敏度的比较
用ELISA试剂盒进行20组阴性样本的检测，检测限是通过20份空白样品的测定平均值加3倍标准差计算而来；胶体金检测卡进行阴性样品添加实验，包括该浓度、50%该浓度、150%该浓度以及30000该浓度，检测限为使用说明书上标注的浓度；仪器检测由于费用较高，检测限参考国标。
试验发现：胶体金检测卡的组织检测限为5μg/kg：我公司的ELISA产品的组织检测限为0.135μg/kg，进口对比ELISA检测产品的组织检测限为0.082μg/kg,国产对比ELISA检测产品的组织检测限0.267μg/kg；GB/T 19857-2005规定孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫和隐性结晶紫的测定方法为液相色谱一串联质谱和高效液相色谱法，液质联用法的检测限均为0 5μg/kg．高效液相色谱法的检测限为2μg/kg。
特异性的比较
系列稀释的竞争物溶液用胶体金检测卡检测； ELISA试剂盒抗体特异性用交叉反应率[Ic50（孔雀石绿）／IC50（竞争物）xlOO%]表示。以系列稀释的竞争物溶液作被检抗原，绘制出各自的标准曲线，得到每种竞争物的IC50值，然后再利用公式求出每种竞争物的交叉反应率。
胶体金检测卡可直接检测孔雀石绿，对于隐性孔雀石绿，可按照说明书提到的方法进行样品处理，然后进行检测，但对浓度为20μg/kg的结晶紫和隐性结晶紫，胶体金试纸则无特异性反应：我公司的试剂盒对MG、CV以及 LMG（氧化后）的交叉反应率为100%：进口试剂对MG, LMG（氧化后）交叉反应率为100%，对CV的交叉反应率仅为40%：国产试剂盒对MG的交叉反应率为10。%，对CV的交叉反应率为90%．对 LMG和LCV的交叉反应率则小于1%。
准确度和精确度的比较
胶体金检测卡与我公司ELISA试剂盒的对比试验及结果：将孔雀石绿、隐性孔雀石绿标准品添加到鱼肉组织样本中，进行20组阴性样本以及20组添加阳性样本的检测。检测20份阴性样品，我公司ELISA试剂盒初检结果为950阴性，并且复检后的阴性样品符合率达lOO%；胶体金检测产品初检阴性样品符合率为85%，复检后达95%：检测20份阳性样品，我公司ELISA试剂盒初检结果为100%阳性，胶体金检测卡初检阳性样品符合率为9500，复检后达100%。